6M氢氧化钠调节pH7,加入5kg D—254强碱性阴离子交换 树脂,搅拌5h左右,交换完毕,弃去液体,用水、2M和 1.2M氯化钠洗涤。用约树脂体积一半的5M氯化钠洗脱, 后用约为树脂体积的1/2的3M氯化钠洗脱,合并洗脱液。
(2)工艺过程 沉淀、脱水、 ③沉淀、脱水、干燥 滤液加入活性炭和95%乙
醇处理,冷处沉淀8~12h。弃去上清液,沉淀中加蒸馏水 和4倍量95%乙醇,冷处放置6h,收集沉淀,用乙醇、丙 酮脱水2次,得肝素钠粗制品。
氯化钠的浓度越大,RCl—的浓度越小,有利 于He-Na的生成,宜用动态洗脱。因RHe-结合较 牢,交换需要相当高的盐浓度,氯化钠常用2M、 3M,能使He-近100%地洗脱下来。
4、CTAB(十六烷基三甲基溴化胺)提取法 CTAB(十六烷基三甲基溴化胺)
20世纪60年代以来,多糖类药物在抗凝、降血脂、提高机体免疫、 20世纪60年代以来,多糖类药物在抗凝、降血脂、提高机体免疫、抗肿 世纪60年代以来 瘤和抗辐射方面都具有显著药理作用与疗效,如从担子菌分离得到的PS— 瘤和抗辐射方面都具有显著药理作用与疗效,如从担子菌分离得到的PS—K PS 多糖和香菇多糖对小鼠S180瘤株均有明显的抑制作用。已作为免疫型抗肿瘤 多糖和香菇多糖对小鼠S 瘤株均有明显的抑制作用。 药物出售。 药物出售。 我国从中药中也提取了不少多糖物质,茯苓多糖、云芝多糖、银耳多糖、 我国从中药中也提取了不少多糖物质,茯苓多糖、云芝多糖、银耳多糖、 胎盘脂多糖等均在临床应用,并取得了一定的治疗效果。 胎盘脂多糖等均在临床应用,并取得了一定的治疗效果。
254为聚苯乙烯二乙烯苯三甲胺季铵型强碱性阴 ①D—254为聚苯乙烯二乙烯苯三甲胺季铵型强碱性阴 254 离子交换树脂,机械强度和耐磨性能差,易破碎, 离子交换树脂,机械强度和耐磨性能差,易破碎,细碎粒 易漂浮而流失。解决办法采用负压吸气气泡翻滚搅拌法, 易漂浮而流失。解决办法采用负压吸气气泡翻滚搅拌法, 利用减压和虹吸将液体吸入或排出反应罐, 利用减压和虹吸将液体吸入或排出反应罐,使树脂始终在 罐内,减少破碎和流失,提高收率。 罐内,减少破碎和流失,提高收率。 肝素是聚阴离子(He 肝素·蛋白质用 蛋白质用He 表示, ②肝素是聚阴离子(He-),肝素 蛋白质用He-Pr表示, 为可溶性。酸性蛋白质,pI以 如果pH选择8.5 pH选择8.5—9 为可溶性。酸性蛋白质,pI以6计,如果pH选择8.5 9, Pr-浓度比Pr浓度大很多,则酸性蛋白与肝素的复合物完 浓度比Pr 浓度大很多, 全可离解;若碱性蛋白质,pI为10,选择pH8.5 pH8.5—9 全可离解;若碱性蛋白质,pI为10,选择pH8.5 9不能促 进蛋白与肝素复合物的离解。必须选择pH11 pH11. 12 12, 进蛋白与肝素复合物的离解。必须选择pH11.5—12,才 能完全离解。 能完全离解。
白色或灰白色粉末,无臭无味,有吸湿性,钠盐易溶于水,不溶乙醇、丙酮、 白色或灰白色粉末,无臭无味,有吸湿性,钠盐易溶于水,不溶乙醇、丙酮、 二氧六环等有机溶剂。是一种含有硫酸基的酸性黏多糖, 二氧六环等有机溶剂。是一种含有硫酸基的酸性黏多糖,其分子具有由六糖 或八糖重复单元组成的线状链状结构。 或八糖重复单元组成的线状链状结构。
海藻和海带中的含量较高,在海藻的洗液里含量可达2%,海带的洗液里约含 海藻和海带中的含量较高,在海藻的洗液里含量可达2%,海带的洗液里约含 1.5%,是提取甘露醇的好原料。用葡萄糖为原料,经电解、脱盐、精制等天选制备。 %,是提取甘露醇的好原料 1.5%,是提取甘露醇的好原料。用葡萄糖为原料,经电解、脱盐、精制等制备。 电解转化率为98%~99 %。还可采用微生物直接发酵法制得 98%~99. 还可采用微生物直接发酵法制得。 电解转化率为98%~99.6%。还可采用微生物直接发酵法制得。
低聚糖: 低聚糖: 多糖:相对分子质量很大,分为直链和支链两种, 多糖:相对分子质量很大,分为直链和支链两种,多带有负电
荷,水合度较大,水溶液具有一定的黏度。多被酸或酶水解变成单 水合度较大,水溶液具有一定的黏度。 糖和低聚糖或其他组成多糖的成分。 糖和低聚糖或其他组成多糖的成分。
1812年 俄国化学家基尔霍夫在加酸煮沸的淀粉中,得到葡萄糖。 1812年 ,俄国化学家基尔霍夫在加酸煮沸的淀粉中,得到葡萄糖。 1819年法国科学家布拉孔诺从木屑、亚麻和树皮中也得到葡萄糖, 1819年法国科学家布拉孔诺从木屑、亚麻和树皮中也得到葡萄糖,才 年法国科学家布拉孔诺从木屑 认识到组成淀粉和纤维素的基本“单元”都是葡萄糖,得实验式C 认识到组成淀粉和纤维素的基本“单元”都是葡萄糖,得实验式C6H12O6。 1886年,德国化学家基利阿尼证明了葡萄糖的碳为直链,没有与完整 1886年 德国化学家基利阿尼证明了葡萄糖的碳为直链, 的水分子相结合。 的水分子相结合。 随后,糖的诸多其他生物学功能也已被逐步揭示和认识。糖蛋白、 随后,糖的诸多其他生物学功能也已被逐步揭示和认识。糖蛋白、糖 脂是细胞膜的重要组成部分,它们作为生物信息的携带者和传递者, 脂是细胞膜的重要组成部分,它们作为生物信息的携带者和传递者,调 节细胞的生长、分化、代谢及免疫反应等。 节细胞的生长、分化、代谢及免疫反应等。
白色晶形粉末,无臭,略有甜味,不潮解,易溶于水, 白色晶形粉末,无臭,略有甜味,不潮解,易溶于水,微溶于低级醇 类和低级胺类、不溶于有机溶剂。在无菌溶液中较稳定, 类和低级胺类、不溶于有机溶剂。在无菌溶液中较稳定,不易为空气 中的氧所氧化。 中的氧所氧化。
3、制剂 、 20%甘露醇注射液:称取结晶甘露醇,用适量注射用水90℃搅拌溶 甘露醇注射液:称取结晶甘露醇,用适量注射用水 ℃ 甘露醇注射液 解,加1%活性炭,加热50分钟过滤,检测pH(4.5-6.5)和含量,合格 活性炭,加热 分钟过滤,检测 ( )和含量, 活性炭 分钟过滤 后,澄清过滤,装入50ml、100ml、250ml输液瓶中,蒸汽灭菌 分钟, 输液瓶中, 分钟, 澄清过滤,装入 、 、 输液瓶中 蒸汽灭菌40分钟 即得甘露醇注射液。 即得甘露醇注射液。 4、检验 、 ;(2)含量测定,碘量法。 (1) pH, 用电位法;( )含量测定,碘量法。 ) , 用电位法;( 5、作用与用途 、 降颅压、眼压 降颅压、
高锰酸钾进行氧化脱色。以滑石粉作助滤剂过滤,收集滤 液。将滤液调节pH6.4,用0.9倍的95%乙醇置于冷处沉淀 6h以上,收集沉淀,再用4倍量的95%乙醇,冷处放置6h以 上、收集沉淀物。干燥得肝素钠精品。肠黏膜换算成总固 体7%计,收率20000U/kg,最高效价141.6U/mg。 2010-12-28 13
从化学结构看,糖是一大类多羟基醛或酮的化合物, 从化学结构看,糖是一大类多羟基醛或酮的化合物, 依据其结构特点分为: 依据其结构特点分为: 单糖: 氨基糖、糖酸、糖醇 单糖: 氨基糖、糖酸、
聚糖: 低聚糖:蔗糖、麦芽糖、乳糖、棉籽糖等。 聚糖: 低聚糖:蔗糖、麦芽糖、乳糖、棉籽糖等。 多糖:纯多糖:右旋糖酐、甘露聚糖(酵母) 果聚糖、 多糖:纯多糖:右旋糖酐、甘露聚糖(酵母)、果聚糖、香
肝素:1916年研究凝血时从肝脏中发现的,天然抗凝血物质。 肝素:1916年研究凝血时从肝脏中发现的,天然抗凝血物质。 年研究凝血时从肝脏中发现的
在自然界中,肝素广泛分布在哺乳动物的肝、 在自然界中,肝素广泛分布在哺乳动物的肝、肺、心、脾、肾、脑腺、 脑腺、 肠动膜、肌肉和血液里,多与蛋白质结合成复合体存在,这种复合物 肠动膜、肌肉和血液里,多与蛋白质结合成复合体存在, 无抗凝血活性。此外,还具有澄清血浆脂质、 无抗凝血活性。此外,还具有澄清血浆脂质、降低血胆固醇和增强抗 癌药物疗效等作用、 癌药物疗效等作用、临床广泛用作各种外科手术前后防治血栓形成和 栓塞,输血时预防血液凝固和保存鲜血时的抗凝作用。 栓塞,输血时预防血液凝固和保存鲜血时的抗凝作用。小剂量时用于 防治高血脂症和动脉粥样硬化。国外用于预防血栓疾病, 防治高血脂症和动脉粥样硬化。国外用于预防血栓疾病,已形成了一 种肝素疗法。 种肝素疗法。
④氧化作用能除去热原、脱色.配合调pH和加热,除去 氧化作用能除去热原、脱色.配合调pH和加热, pH和加热 杂质,提高肝素的效价。有机杂质少时,氧化时间短, 杂质,提高肝素的效价。有机杂质少时,氧化时间短,否 则反之。由于高锰酸钾氧化作用较强,破坏肝素和增加K 则反之。由于高锰酸钾氧化作用较强,破坏肝素和增加K的 含量,故改用加入总量4 的过氧化氢,分两次加、 含量,故改用加入总量4%的过氧化氢,分两次加、好于单 用高锰酸钾,不增加水溶液的新成分。1977年国内研究成 用高锰酸钾,不增加水溶液的新成分。1977年国内研究成 功的过氧化氢—高锰酸钾组合氧化工艺 高锰酸钾组合氧化工艺, 功的过氧化氢 高锰酸钾组合氧化工艺,克服了单用高锰 酸钾氧化破坏肝素的缺点。 酸钾氧化破坏肝素的缺点。具体操作是先用低浓度的过氧 化氢,在碱性介质中室温进行氧化,由于条件温和,可长 化氢,在碱性介质中室温进行氧化,由于条件温和, 时间放置。剩下难氧化的杂质,逐渐升温氧化, 80℃时 时间放置。剩下难氧化的杂质,逐渐升温氧化,至80℃时, 再加高锰酸钾最后氧化.即可完成。 再加高锰酸钾最后氧化.即可完成。
菇多糖、茯苓多糖、淀粉等 菇多糖、茯苓多糖、 杂多糖:肝素、硫酸软骨素、透明质酸等。 杂多糖:肝素、硫酸软骨素、透明质酸等。
性质 单糖:还原性、与苯肼反应、在稀酸溶液中稳定、在 单糖:还原性、与苯肼反应、在稀酸溶液中稳定、